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          如何形成厭氧培養(yǎng)箱操作室的環(huán)境

          來源:常州中捷實(shí)驗(yàn)儀器制造有限公司   2025年02月06日 07:09   115

          厭氧培養(yǎng)箱是一種可在無氧環(huán)境下進(jìn)行**培養(yǎng)及操作的專用裝置,可培養(yǎng)*難生長的厭氧生物在大氣中操作時(shí)接觸氧而死亡的危險(xiǎn)性。

            1. 厭氧培養(yǎng)箱應(yīng)安放在溫差較小、操作方便的位置,應(yīng)避免陽光直曬和遠(yuǎn)離采暖設(shè)備,放置平穩(wěn);

            2. 將混合氣瓶、氮?dú)馄堪卜牌椒€(wěn),并分別裝好減壓閥(含壓力表),安置在適當(dāng)位置;

            3. 接上氣路并檢查氣路,為防止漏氣,必要時(shí)可在各接管處用密封膠粘合;

            一、皓莊厭氧培養(yǎng)箱操作室厭氧環(huán)境形成:

            1. 按使用要求放置好必要的附件和器具,并向操作室內(nèi)放入二個(gè)無毒塑料袋;

            2. 通電源開照明燈,開溫控儀,調(diào)節(jié)所需溫度及安全溫度;

            3. 操作室內(nèi)放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入美蘭指示劑(封閉);

            4. 關(guān)緊取樣室內(nèi)外門,并抽真空校驗(yàn);

            5. 操作室內(nèi)**次置換(氮?dú)庵脫Q):

            A. 先用橡皮管插入操作室內(nèi)進(jìn)氣口,另一頭插入塑料袋;

            B. 接通氮?dú)膺M(jìn)氣路,打開氮?dú)饪刂崎y1,使二只塑料袋充足氮?dú)?,關(guān)閉閥門1,然后扎緊袋口;

            C. 把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊;

            D. 把塑料袋內(nèi)氮?dú)鉂u漸放于操作室內(nèi),至全部放出。

            6. 操作室**次置換(氮?dú)庵脫Q)重復(fù)一次充氮過程,取樣室先抽真空,并注意隨時(shí)用腳踏開關(guān)開閉排氣。

            7. 操作室第三次置換(混合氣體置換):(混合氣體配比為N2 85%、H2 10%、CO2 5%)

            A. 調(diào)換氣路打開混合氣閥3進(jìn)氣,充氣時(shí)取樣室先抽真空,并隨時(shí)用腳踏開關(guān)開閉排氣;

            B. 混合氣充滿塑料袋后,關(guān)掉混合氣閥并打開閥5,使混合氣經(jīng)過流量計(jì),調(diào)整流量計(jì),流量為每分鐘10ml左右;

            C. 把塑料袋內(nèi)混合氣漸漸排于操作室內(nèi);

            D. 通過三次換氣后,操作室內(nèi)氣體含氧量已處于極微量狀態(tài)。

            8. 操作室內(nèi)打開粑粒除氧劑,接通除氧催化器電源進(jìn)行催化除氧,一小時(shí)后開美蘭指示劑(美蘭安瓶)觀察其變**況,不變色為操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境;

            9. 開紫外線**燈,室內(nèi)進(jìn)行**處理,**時(shí)間按具體實(shí)驗(yàn)自定。

            2、菌種的置入和培養(yǎng):

            1. 檢查取樣室內(nèi)門并關(guān)緊之;

            2. 打開取樣室外門,將菌種放入取樣室后即關(guān)上外門;

            3. 取樣室充氮置換三次過程:打開真空泵,先抽真空度500ml汞柱(66kPa)以上停,然后人工打開氮?dú)忾y2進(jìn)氣,使指針回復(fù)零位,關(guān)掉閥2。**次重復(fù)操作一次。第三次操作時(shí),使真空度500ml汞柱(66kPa)以上停,然后打開閥4進(jìn)混合氣,使指針回復(fù)零位,后掉閥4。取樣室充氮置換三次過程結(jié)束;

            4. 如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù);

            5. 取樣室內(nèi)外門開啟、關(guān)緊,再抽低真空度100ml汞柱(13kPa)檢驗(yàn);

            6. 厭氧培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用的條件:

            A. 每天在操作室內(nèi)打開美蘭指示劑觀察,如不正常就必須重新?lián)Q氣;

            B. 要長期連續(xù)輸入微量的混合氣體,使補(bǔ)進(jìn)的氮?dú)饽芎臀⒘康难踅Y(jié)合通過催化吸收,保證室內(nèi)厭氧狀態(tài),補(bǔ)入混合氣流量選定為每分鐘10ml左右;

            C. 連續(xù)培養(yǎng)運(yùn)行**,更換一次除氧劑和干燥劑。

            7. 操作室內(nèi)培養(yǎng)室內(nèi)室溫度可任意選擇和控制。

            8. 混合氣瓶、氮?dú)馄枯敵鰤毫φ{(diào)整:調(diào)節(jié)減壓閥,使輸出壓力0.1Mpa左右。

            注意事項(xiàng)

            1. 儀器盡可能地安裝于空氣清凈、溫度變化較小的地方;

            2. 開機(jī)前應(yīng)**熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的使用說明,掌握正確使用方法;

            3. 培養(yǎng)物放入必須是在操作室內(nèi)達(dá)到優(yōu)良厭氧環(huán)境后放入;

            4. 如發(fā)生故障(停氣等原因)操作室內(nèi)仍可保持12小時(shí)厭氧狀態(tài)(超過12小時(shí)則根據(jù)需要把培養(yǎng)物取出另作處理);

            5. 經(jīng)常注意氣路有無漏氣現(xiàn)象;

            6. 調(diào)換氣瓶時(shí),注意要扎緊氣管,避免流入含氧氣體;

            7. 真空泵按要求使用,定期檢查加油。

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